补益肾气法干预SHR大鼠大动脉硬化机制实验研究

摘要：目的:探讨补益肾气法干预自发性高血压大鼠(SHR)大动脉硬化的机制.方法:选择8周龄SHR 60只,8周龄Wistar-Kyoto大鼠(WKY)20只,雌雄各半.将SHR随机分为补肾中药组、阳性药物氨氯地平对照组、模型对照组,同时将WKY大鼠20只组作为正常对照组.补肾中药组采用益肾降压方治疗,模型组与正常组给予等容量的生理盐水;每组分别于大鼠第10,22,34,46周龄开始干预.标准尾部测压法测量尾动脉收缩压;蛋白质免疫印迹法(Western blot)对比基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)表达水平的变化.结果:①模型对照组SHR大鼠随着周龄的增加,收缩压不断上升,与上一周龄大鼠比较,差异有统计学意义(P＜0.01).补肾中药组SHR大鼠用药后收缩压明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05);氨氯地平组用药后12周开始收缩压明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05).②与正常对照组比较,模型对照组中Col Ⅰ表达水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);补肾中药组和氨氯地平组与模型对照组比较Col Ⅰ的表达水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);补肾中药组与氨氯地平组中Col Ⅰ表达水平相当,差异无统计学意义(P＞0.05).③模型对照组与正常对照组中MMP-9表达水平相比明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);补肾中药组和氨氯地平组与模型对照组中MMP-9表达水平相比升高,差异有统计学意义(P＜0.05);补肾中药组与氨氯地平组中MMP-9表达水平相当,差异无统计学意义(P＞0.05).④与正常对照组比较,模型对照组TIMP-1表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.01),补肾中药组和氨氯地平组与模型对照组比较TIMP-1表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05),补肾中药组和氨氯地平组与正常对照组的TIMP-1表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).⑤MMP-9/TIMP-1模型对照组明显低于正常对照组(P＜0.05),氨氯地平组和补肾中药组略低于正常对照组,但均高于模型对照组.⑥Col Ⅰ表达灰度值补肾中药组和氨氯地平组较模型对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05),正常对照组较模型对照组低,差异有统计学意义(P＜0.01).MMP-9表达灰度值补肾中药组和氨氯地平组较模型对照组高,差异有统计学意义(P＜0.05),正常对照组较模型对照组高,差异有统计学意义(P＜0.01).TIMP-1表达灰度值补肾中药组和氨氯地平组较模型对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05),正常对照组较模型对照组低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:补益肾气法可抑制动脉硬化进展,其机制是通过调节血管中基质金属蛋白酶含量,提高动脉中基质金属蛋白酶对胶原纤维蛋白的降解能力,维持血管壁的韧性及弹性与动脉斑块稳定,抑制动脉硬化的进展.